惡性纖維組織肉瘤通過TALEN技術構建了p53基因敲除大鼠模型，在p53基因外顯2設計TALEN結(jié)合位點，通過PCR及；實驗周期短與繁殖能力強 大小鼠生命周期短小鼠約2年，大鼠約3年，繁殖速度快雌鼠每3周可產(chǎn)一窩幼崽，且單胎產(chǎn)仔數(shù)多小鼠通常68只胎這一特性顯著縮短了基因編輯實驗的周期例如，通過CRISPRCas9構建基因敲除小鼠模型僅需數(shù)月，而大型動物模型如非人靈長類可能需要數(shù)年操作。

利用CRISPRCAS9 編修基因，剔除體內(nèi)HIV 病毒基因 由Kamel Khalili帶領的研究團隊嘗試使用基因編輯的方式來治療愛滋病幾年前，他們使用基因編輯工具 CRISPRCas9成功的剔除來自愛滋病患的細胞然而，只有細胞實驗的數(shù)據(jù)尚不足以發(fā)展一種新的療法，因此這次他們嘗試使用活體動物來進行試驗他們使用大鼠；賽業(yè)生物服務在198種腫瘤細胞中實現(xiàn)基因敲除敲入，CRISPRPro技術可徹底敲除大片段基因四技術挑戰(zhàn)。

Cas9基因敲除不表達

解決方案通過設計雙SagRNA或使用SaCas9變體如SaCas9KKH擴展PAM兼容性四典型應用場景基因功能研究通過敲除或敲入特定基因，解析基因在疾病中的作用機制動物模型構建利用AAV體內(nèi)轉(zhuǎn)導能力，快速生成條件性基因敲除小鼠或大鼠模型基因治療開發(fā)遞送治療性基因或編輯致病突變?nèi)珑牭缎拓氀Y。

cas9基因敲除位點怎么找

1、蛋白質(zhì)編碼序列改變，基因功能喪失敲除應用無需物種特異性干細胞系如小鼠ES細胞，可直接在受精卵水平實現(xiàn)敲除已成功用于小鼠大鼠豬靈長類果蠅等模式生物的基因敲除2同源介導修復HR特點高保真性需模板發(fā)生概率低僅在細胞周期SG2期活躍過程以外源DNA為。

2、在ES細胞中他們更是成功的一次敲除了五個基因與ZFNTALEN相比，CRISPRCas更易于操作，效率更高，更容易得到純合子突變體，而且可以在不同的位點同時引入多個突變但該系統(tǒng)是否有脫靶效應尚需進一步的研究 傳統(tǒng)的轉(zhuǎn)基因和基因打靶技術，由于技術穩(wěn)定成熟，可以對小鼠和大鼠的基因組序列進行各種修飾。

3、此外，還證明了利用 CRISPRCas 技術構建的基因敲除大鼠模型與傳統(tǒng)方法構建的同一基因肥胖相關 G 蛋白。